玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基
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SS1008玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基(Rose Bengal Agar)
用 途: 供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用(《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版)。
原 理: 胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷酸二氫鉀為緩沖劑;硫酸鎂提供必須的微量元素;玫瑰紅鈉作為選擇性抑菌劑可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),并可減緩某些霉菌因生長(zhǎng)過(guò)快而導(dǎo)致菌落漫延生長(zhǎng);瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
配方(每升):
胨
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5g
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葡萄糖
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10g
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磷酸二氫鉀
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1g
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硫酸鎂
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0.5g
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玫瑰紅鈉
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0.0133g
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瓊脂
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15g
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最終pH 6.0±0.2
使用方法(計(jì)數(shù)用法):
1、 稱(chēng)取本品30.5g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌20min。
2、 檢樣的稀釋處理,略。
3、 根據(jù)對(duì)樣品污染情況的估計(jì),選擇3個(gè)合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時(shí),吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中,每個(gè)稀釋度做2—3個(gè)平皿。
4、 將涼至45℃左右的培養(yǎng)基約15mL注入平皿中,待瓊脂凝固后,倒置于20—25℃溫箱中培養(yǎng)72h,對(duì)于菌落微小點(diǎn)計(jì)困難的平板可延續(xù)培養(yǎng)到4—5d再進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。
5、 計(jì)數(shù)、報(bào)告:
(1)計(jì)數(shù):一般情況下,玫瑰紅鈉平板計(jì)點(diǎn)霉菌或酵母菌數(shù),如在該平板上生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落數(shù)多于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上生長(zhǎng)的菌落數(shù)時(shí),則應(yīng)同時(shí)點(diǎn)計(jì)細(xì)菌數(shù),并將該菌數(shù)作 為供試品的細(xì)菌數(shù)報(bào)告。固體供試品在玫瑰紅鈉瓊脂平板上點(diǎn)計(jì)霉菌落數(shù),液體供試品則需在玫瑰紅鈉瓊脂平板上點(diǎn)計(jì)霉菌與酵母菌菌數(shù);含蜂蜜及王漿的合劑需以 玫瑰紅鈉平板的霉菌菌落數(shù)加上酵母膏粉胨葡萄糖瓊脂平板的酵母菌菌落數(shù)作為供試品的霉菌、酵母菌總數(shù)。
(2)報(bào)告:通常選擇菌落數(shù)在30-100之間的稀釋級(jí)的平板計(jì)數(shù),以該稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告。
質(zhì)量控制: 本品傾注平皿后呈玫瑰紅色,下列菌株接種后20—25℃培養(yǎng)72h生長(zhǎng)情況如下表。
菌 名
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菌 號(hào)
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生長(zhǎng)狀況
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菌落特征
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黑曲霉
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ATCC16404
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良好
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菌絲白色孢子黑色,底部玫瑰紅色
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白色念珠菌
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ATCC10231
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良好
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菌落表面呈奶油色
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大腸埃希氏菌
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ATCC25922
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被抑制
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貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。
規(guī) 格:250g