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SS0101營(yíng)養(yǎng)瓊脂(Nutrient Agar)

用    途： 一般細(xì)菌總數(shù)測(cè)定，保存菌種及純培養(yǎng)。（《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版）

原    理： 蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源；氯化鈉能維持均衡的滲透壓；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

配方（每升）：

最終pH 7.2±0.2

使用方法：

1、   稱取本品32.0g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，備用。

2、   (食品)以無(wú)菌操作稱取檢樣25.0克（或25.0mL），放入含有225.0mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠），充分振搖，即為1：10的均勻稀釋液。依次做1：100，1：1000……稀釋液。

3、   根據(jù)對(duì)樣品污染情況的估計(jì)，選擇2～3個(gè)合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋的同時(shí)，吸取1.0mL稀釋液于滅菌平皿中，每個(gè)稀釋度做2個(gè)平皿。

4、   稀釋液移入平皿后應(yīng)及時(shí)將涼至46℃左右的培養(yǎng)基注入平皿約15.0mL，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻，同時(shí)將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1.0mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。待瓊脂凝固后，倒置于36±1℃溫箱中培養(yǎng)48±2h。

5、   觀察結(jié)果。

6、   菌落計(jì)數(shù)方法：

做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)，可用肉眼觀察，必要時(shí)用放大鏡檢查，以防遺漏，在計(jì)下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。

7、   菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告：                                                

選取菌落數(shù)在30～300之間的平板作為菌落總數(shù)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)。一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板，應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù)，其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng) 時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以2 以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有我鏈狀菌落生長(zhǎng)時(shí)（菌落之間無(wú)明顯界線），若僅有一條鏈，可視為一個(gè)菌落；如有不同來源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈視為一個(gè)菌落 計(jì)。

A：稀釋度的選擇：

應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30～300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見附表)。

若有兩個(gè)稀釋度.其生長(zhǎng)的菌落數(shù)無(wú)均在30～300之間，則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2，則應(yīng)報(bào)告其平均數(shù)；若大于2則報(bào)告其較小的數(shù)字(見表中例2及3)。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表中例4)。

若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最底的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表中例5)。

若所有稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以最底稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表中例6)。

若有稀釋度的平均菌菌落數(shù)均不在30～300之間，其中一部分大于300或小于30時(shí)，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見表中例7)。

菌落數(shù)的報(bào)告：

    菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按其實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在二位數(shù)字后面的有效數(shù)值，以四舍五入法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)，也可以用10的指數(shù)來表示(見表中“報(bào)告方式欄”)。

 

質(zhì)量控制：

          本品接種下列菌株，置于36±1℃溫箱中培養(yǎng)48±2h，結(jié)果如下：

 

貯   存：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。

 

規(guī)   格：250g